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（1）图中②是以mRNA为模板合成DNA的逆转录过程，需要逆转录酶的参与．
（2）①是获取胰岛素mRNA的过程，由于基因是选择性表达的，人的肝细胞中不转录出胰岛素mRNA，因此不能利用人的肝细胞来完成①过程．
（3）⑧是将目的基因导入受体细胞的过程，当受体细胞是微生物细胞时，常采用感受态细胞法，即用CaCl2处理微生物细胞使其成为易于吸收周围环境中DNA分子的感受态细胞，从而将目的基因导入受体细胞．D为受体细胞，一般选用大肠杆菌或枯草杆菌，原因是它们繁殖速度快，目的基因表达迅速．
（4）检测目的基因是否表达产生相应的蛋白质可采用抗原-抗体杂交法．
（5）基因表达载体含有启动子、目的基因、终止子、复制原点和标记基因．
（6）现研究发现糖尿病发生的根本原因是基因突变，因此根治糖尿病的最佳方法是基因治疗．
故答案为：
（1）逆转录
（2）不能皮肤细胞中的胰岛素基因不表达，不能形成胰岛素mRNA
（3）CaCl2?（Ca2+）?繁殖速度快，目的基因表达迅速
（4）抗原-抗体杂交
（5）标记基因
（6）基因治疗
生物工程制备疫苗有哪些？
第一,大肠杆菌是一种常见菌种.人们对其细胞形态及生理生化特性已经了解比较深入,对于培养基配制与运载体导入的具体技术等方面也就更容易把握.
第二,细菌质粒(游离于细菌等微生物细胞质中的小型环状DNA分子)是基因工程常用的运载体(与目的基因结合的工具),而大肠杆菌质粒又是最常用的质粒,因为大肠杆菌质粒上有诸如抗青霉素基因等易于检测的标记基因,并且容易使目的基因在宿主细胞中复制和表达.而最适合大肠杆菌质粒完成使命的场所当然就是它的天然来源—大肠杆菌.
第三,大肠杆菌是一种典型兼性厌氧行细菌,由于体积小,表面积与体积的比例很大,并且能利用氧气进行彻底生物氧化释放大量能量,因而能够与外界迅速进行物质和能量交换,并在体内迅速转化.这样一来使大肠杆菌新陈代谢极其迅速,就如同一个效率极高的化工厂,而与真正化工厂相比所需反应条件又很温和,容易达到,其经济效益是显而易见的.
综合以上考虑大肠杆菌常选为宿主菌用于基因工程也就不足为怪了
应用常规技术生产疫苗存在着抗原来源困难、有副作用和不够安全等问题。1979年，英国爱丁堡大学麦莱实验室首先使乙型肝炎病毒表面抗原基因在大肠杆菌中表达，但产量很低。1983年，通过国际合作终于使酵母菌生产乙型肝炎病毒表面抗原的实验研究取得成功，1986年，美国食品与药物管理局批准美国默克公司生产这种基因工程乙型肝炎疫苗。由于疫苗成分中只有乙型肝炎病毒表面抗原，副作用极小，安全性很好，被称为第二代乙型肝炎疫苗，是迄今基因工程最成功的例子之一。此外，丙型肝炎疫苗以及狂犬病、麻疹、霍乱、破伤风、百日咳、小儿麻痹症、白喉、麻风等基因工程疫苗都在研究之中。中国已于1992年将基因工程乙型肝炎疫苗确定为全国新生儿普种的疫苗产品，还组建了含接近完整的甲型肝炎病毒互补DNA的质粒。
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